醫(yī)學分子生物學

第一章 染色體和基因
第一節(jié) 基因的概念
一、基因的生物學定義
二、基因的分子生物學定義
三、細胞基因組
第二節(jié) 原核生物與真核生物
一、生物種類
二、原核細胞和真核細胞內核酸含量、種類和功能的差異
第三節(jié) 病毒基因組
第四節(jié) 細菌基因組
一、細菌染色體基因組的結構特點
二、大腸桿菌
三、質粒
第五節(jié) 真核生物基因及特點
一、真核生物基因組的一般特點
二、真核生物基因組的C值矛盾
三、真核生物DNA序列的類型
四、多基因家族
五、DNA指紋技術
第六節(jié) 染色質的結構
一、染色質的主要成分
二、核小體是染色質的基本結構單位
第七節(jié) 染色體形態(tài)、功能研究中所用術語與新技術簡介
小結
第二章 細胞周期和細胞凋亡
第一節(jié) 細胞周期
一、細胞周期
二、細胞周期的控制點
第二節(jié) 細胞周期的調控
一、細胞因子與相應的受體
二、周期素與周期素依賴性激酶對細胞周期的調控
三、參與細胞周期調控的原癌基因及抑癌基因
四、cAMP與cGMP在細胞周期中的變化
第三節(jié) 細胞凋亡
一、細胞凋亡
二、細胞凋亡的基因調控
小結
第三章 重組DNA技術概述
第一節(jié) 分子生物學簡史及重組DNA技術的誕生
一、重組DNA技術誕生的理論基礎
二、關鍵性實驗技術問世為重組DNA技術奠基
第二節(jié) 重組DNA技術的定義及步驟
一、重組DNA技術定義
二、重組DNA技術的重大意義
三、重組DNA技術的基本步驟
第三節(jié) 重要的工具酶
一、限制性核酸內切酶
二、DNA聚合酶
三、DNA連接酶
四、T4多核苷酸激酶
五、堿性磷酸酶
小結
第四章 獲得目的基因
第一節(jié) 獲得目的基因的原理方法
一、構建cDNA文庫篩選目的基因
二、構建真核細胞基因組文庫篩選目的基因
三、人工合成目的基因DNA片段
四、聚合酶鏈反應合成DNA
五、其他方法
第二節(jié) 獲得目的基因方法的選擇原則
一、根據(jù)獲得目的基因的目的選擇方法
二、根據(jù)目的基因本身特點選擇方法
三、根據(jù)實驗室設備條件選擇方法
第三節(jié) 目的基因序列測定
一、目的基因序列測定的意義
二、目的基因測序方法
三、長鏈DNA測序的策略
小結
第五章 重組體的構成、導入和篩選
第一節(jié) 基因克隆的載體
一、質粒載體
二、噬菌體載體
第二節(jié) 目的基因與載體的連接
一、連接的策略
二、連接反應的建立
第三節(jié) 重組子導入受體菌
一、氯化鈣法
二、電穿孔法
第四節(jié) 重組子的篩選與鑒定
一、插入片段長度鑒定
二、插入片段方向性鑒定
小結
第六章 重組體在宿主細胞中表達與調控
第一節(jié) 基因表達概述
一、基因表達的概念
二、基因表達的基本條件
第二節(jié) 重組體在原核細胞中的表達
一、原核生物基因表達的特點
二、外源基因在原核細胞中表達的重要調控元件
三、原核細胞表達載體簡介
四、對外源目的基因的要求
第三節(jié) 重組體在真核細胞中表達的策略
一、哺乳動物細胞表達的優(yōu)點及載體種類
二、真核細胞表達元件
三、哺乳動物基因轉移的遺傳選擇性標記
四、表位標記
五、基因表達產(chǎn)物的檢測——Western印跡法
第四節(jié) 表達產(chǎn)物的分離與純化
一、包涵體中重組蛋白質的分離與純化
二、蛋白質純化技術
小結
第七章 核酸的雜交
第一節(jié) 核酸雜交的基本原理
一、核酸變性
二、核酸的復性
三、核酸雜交概念
第二節(jié) 核酸探針
一、探針的概念
二、探針種類和選擇
三、探針標記原理
第三節(jié) 核酸分子雜交技術
一、液相分子雜交
二、固相分子雜交
小結
第八章 聚合酶鏈式反應
第一節(jié) PCR基本原理和影響因素
一、基本原理
二、參與PCR反應體系的因素及其作用
第二節(jié) 常用的幾種PCR反應
一、反轉錄PCR
二、定量PCR
三、堿基替代PCR
四、彩色PCR
五、重組PCR
六、不對稱PCR
七、膜結合PCR
八、固著PCR
九、原位PCR
十、反向PCR
第三節(jié) PCR在分子生物學中的應用
一、用PCR制備cDNA文庫與篩選
二、PCR直接測序法
三、PCR用于染色體區(qū)帶特異片段克隆
四、檢測突變堿基
五、用簡并引物法擴增未知序列
六、用PCR標記DNA探針
七、PCR與新基因的尋找
第四節(jié) PCR在臨床醫(yī)學中的應用
一、病原體檢查
二、遺傳病的基因診斷
三、腫瘤的診斷、轉移確定
四、PCR用于組織器官移植的配型選擇
小結
第九章 分子免疫學
第一節(jié) 免疫球蛋白
一、免疫球蛋白分子基本結構
二、免疫球蛋白基因的染色體定位
三、免疫球蛋白基因結構的重排
四、抗體多樣性的形成
第二節(jié) T細胞抗原受體
一、T細胞抗原受體結構
二、T細胞抗原受體基因結構和重排
第三節(jié) 主要組織相容性復合體
一、MHC分子結構
二、MHC基因結構
三、MHC基因的生物學功能
四、MHC分子參與對抗原的處理和識別
第四節(jié) 細胞因子
一、細胞因子的共同特征
二、細胞因子的功能
三、細胞因子及其受體結構特點
四、細胞因子基因
小結
第十章 神經(jīng)營養(yǎng)因子
第一節(jié) 神經(jīng)營養(yǎng)因子總論
一、神經(jīng)營養(yǎng)因子的種類
二、細胞因子的功能特點
第二節(jié) 神經(jīng)生長因子各論
一、神經(jīng)營養(yǎng)因子
二、白細胞介素6
第三節(jié) 神經(jīng)營養(yǎng)因子與疾病
一、細胞因子與神經(jīng)再生
二、神經(jīng)營養(yǎng)因子與受體
三、老年性癡呆
小結
第十一章 癌基因和腫瘤抑制基因
第一節(jié) 腫瘤細胞的特征
一、腫瘤是一種基因的疾病
二、腫瘤細胞在體外培養(yǎng)中的特征
第二節(jié) 腫瘤病毒和癌基因
一、DNA腫瘤病毒和癌基因
二、反轉錄病毒和癌基因
第三節(jié) 腫瘤抑制基因
一、腫瘤抑制基因存在的證據(jù)
二、RB基因——控制細胞周期的腫瘤抑制基因
三、p53基因——“基因組的保護神”
第四節(jié) 腫瘤形成的多步驟學說
一、多步驟學說的實驗證據(jù)
二、人類直腸癌和多步驟致癌說
小結
第十二章 基因診斷和基因治療
第一節(jié) 基因診斷
一、基因診斷的定義、原理
二、基因診斷的途徑
三、基因診斷的技術和方法
四、分子探針
五、基因診斷在感染性疾病、遺傳病和腫瘤中的應用
第二節(jié) 基因治療的基本概念和策略
一、基因治療的概念
二、基因治療的策略
第三節(jié) 基因治療的條件
一、目的基因的獲得
二、靶細胞的選擇
三、基因轉移的方法
小結
第十三章 DNA重組技術在醫(yī)學和制藥工業(yè)中的應用
第一節(jié) DNA重組技術的應用
一、重組蛋白質的表達系統(tǒng)
二、利用細菌作為表達系統(tǒng)
三、利用酵母細胞作為表達系統(tǒng)
四、利用哺乳動物細胞作為表達系統(tǒng)
第二節(jié) 蛋白質工程
一、抗體工程
二、蛋白質工程的其他應用
三、噬菌體展示法
第三節(jié) 轉基因動物和“動物藥廠”
一、轉基因動物
二、“動物藥廠”
三、抗感染動物
第四節(jié) 動物克隆
小結