動物細胞培養(yǎng)技術(shù)

第一章 細胞培養(yǎng)概述
一、細胞培養(yǎng)發(fā)展簡史
二、細胞培養(yǎng)的基本概念
三、細胞培養(yǎng)實驗的基本要求
第二章 細胞培養(yǎng)準備技術(shù)
第一節(jié) 實驗器材清洗、包裝和消毒
一、常用的實驗器材
二、清洗
三、包裝
四、消毒
第二節(jié) 實驗室常用的儀器設備使用和維護
一、凈化臺
二、自動雙重純水蒸餾器
三、抽氣泵
四、壓力蒸汽消毒器
五、電熱恒溫培養(yǎng)箱
六、電熱恒溫干燥箱
七、液氮生物容器
八、C02培養(yǎng)箱
九、冰箱
第三節(jié) 動物細胞用液制備
一、蒸餾水
二、平衡鹽溶液
三、天然培養(yǎng)基
四、合成培養(yǎng)基
五、血清細胞培養(yǎng)基
六、無血清細胞培養(yǎng)基
七、消化液
八、穩(wěn)定劑
九、蛋白酶抑制劑
十、pH調(diào)整液
十一、20 mmol／L L一谷氨酰胺
十二、抗菌素液
十三、細胞用液的分裝方法和要求
思考題
第三章 細胞培養(yǎng)基本技術(shù)
第一節(jié) 細胞原代培養(yǎng)
一、乳鼠肺組織原代培養(yǎng)程序
二、原代細胞實驗操作要領
三、原代細胞實驗注意事項
四、原代細胞實驗取材
五、原代細胞培養(yǎng)方法介紹
第二節(jié) 培養(yǎng)細胞的觀察
一、培養(yǎng)細胞分型
二、細胞培養(yǎng)中的常用術(shù)語
三、培養(yǎng)細胞一代生長過程
四、細胞周期
五、培養(yǎng)細胞的生命期
第三節(jié) 培養(yǎng)細胞常規(guī)檢查和生物學檢測
一、培養(yǎng)細胞常規(guī)檢查
二、培養(yǎng)細胞的生物學檢查和鑒定
第四節(jié) 細胞傳代培養(yǎng)
一、細胞傳代方法
二、乳鼠原代肺細胞培養(yǎng)物傳代
三、蓋玻片條細胞培養(yǎng)法
四、死、活細胞鑒別試驗
第五節(jié) 細胞凍存、復蘇、運輸和短期保存
一、影響凍存細胞活性的因素
二、細胞凍存方法
三、組織細胞短期保存方法
四、細胞復蘇方法
五、細胞運輸
六、引進細胞的方法
思考題
第四章 細胞培養(yǎng)研究技術(shù)
第一節(jié) 細胞的分離和純化
一、成纖維細胞的分離和去除
二、骨髓和外周血有核細胞的純化
三、腫瘤細胞的分離純化
四、單核細胞和巨噬細胞的純化
五、上皮細胞的純化
六、細胞移速分離純化
第二節(jié) 培養(yǎng)細胞活力檢測方法
一、細胞克隆形成試驗
二、細胞活性染色法
三、細胞四唑鹽比色法
第三節(jié) 細胞形態(tài)學研究方法
一、培養(yǎng)細胞的固定
二、培養(yǎng)細胞常用染色法
三、細胞免疫化學染色
四、培養(yǎng)細胞透射電鏡樣品的制備
五、培養(yǎng)細胞掃描電鏡樣品的制備
第四節(jié) 細胞遺傳學的檢測方法
一、細胞DNA定量的測定
二、細胞DNA合成的測定
三、細胞DNA雙參數(shù)的測定
四、人體外周血淋巴細胞染色體標本的制備
五、培養(yǎng)細胞染色體標本的制備
六、染色體G顯帶
七、姐妹染色單體區(qū)分染色法
第五節(jié) 顯微攝影技術(shù)
一、顯微鏡的光學部件和顯微照相操作
二、相差顯微鏡
三、熒光顯微鏡
第五章 原代細胞培養(yǎng)和分析
第一節(jié) SD乳鼠心肌細胞的分離培養(yǎng)
一、準備
二、心肌細胞的分離培養(yǎng)
三、原代心肌細胞生長觀察
四、討論
第二節(jié) 大鼠血管平滑肌細胞的分離培養(yǎng)
一、準備
二、取材
三、血管平滑肌細胞的分離培養(yǎng)
四、原代血管平滑肌細胞生長觀察
五、討論
第三節(jié) 成人前脂肪細胞的分離培養(yǎng)
一、準備
二、前脂肪細胞的分離培養(yǎng)
三、原代前脂肪細胞生長觀察
四、討論
第四節(jié) 大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的分離培養(yǎng)
一、準備
二、肺微血管內(nèi)皮細胞的分離培養(yǎng)
三、原代肺微血管內(nèi)皮細胞生長觀察
四、討論
附錄一 國內(nèi)外細胞庫
附錄二 動物常用的細胞注射技術(shù)
參考文獻