現(xiàn)代細胞生物學(xué)技術(shù)

前言
第1章 研究顯微鏡與顯微圖像分析技術(shù)
1.1 普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用
1.2 倒置相差顯微鏡的原理及使用
1.3 熒光顯微鏡的原理及使用
1.4 激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)
1.5 顯微操作技術(shù)
1.5.1 體細胞顯微注射技術(shù)
1.5.2 受精卵顯微注射技術(shù)
1.6 活細胞熒光顯微成像技術(shù)
1.7 細胞顯微圖像分析技術(shù)
第2章 電鏡技術(shù)
2.1 透射電鏡
2.2 TEM樣品制備技術(shù)
2.2.1 TEM超薄切片技術(shù)
2.2.2 TEM負染色技術(shù)
2.2.3 TEM細胞化學(xué)技術(shù)
2.2.4 石蠟組織與石蠟切片的TEM樣品制備
2.3 掃描電子顯微鏡
2.4 SEM樣品制備
2.4.1 常規(guī)SEM生物樣品制備
2.4.2 SEM游離細胞制備
2.4.3 SEM免疫細胞化學(xué)技術(shù)
第3章 細胞化學(xué)技術(shù)
3.1 普通細胞化學(xué)
3.1.1 細胞化學(xué)理論知識
3.1.2 PAS（periodic acid Sehiff reaction）法顯示糖原
3.1.3 蘇丹Ⅲ染色法顯示脂類
3.1.4 酸性蛋白與堿性蛋白的顯示
3.1.5 細胞骨架微絲蛋白的顯示
3.1.6 Feulgen法顯示核酸
3.1.7 甲基綠-派洛嚀法顯示核酸
3.1.8 Giemsa染色法顯示染色質(zhì)/體
3.1.9 蘇木精-伊紅染色顯示細胞核和細胞質(zhì)
3.2 酶細胞化學(xué)
3.2.1 酶細胞化學(xué)的基本理論
3.2.2 堿性磷酸酶顯示
3.2.3 金屬沉淀法顯示酸性磷酸酶
3.2.4 聯(lián)苯胺法顯示過氧化物酶
3.2.5 通過琥珀酸脫氫酶活性進行MTT法檢測細胞相對存活率
3.3 免疫細胞化學(xué)
用ABC方法來鑒定體外培養(yǎng)的小鼠星形膠質(zhì)細胞
3.4 熒光細胞化學(xué)與免疫熒光細胞化學(xué)
3.4.1 吖啶橙熒光染色法
3.4.2 間接免疫熒光細胞化學(xué)法顯示細胞中的微管蛋白
3.4.3 用雙重免疫熒光標(biāo)記法鑒定體外培養(yǎng)的小鼠神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞
3.4.4 用雙重免疫熒光法鑒定組織切片中的兩種細胞的方法
第4章 細胞培養(yǎng)技術(shù)
4.1 細胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù)
4.1.1 細胞在體外生長的條件
4.1.2 培養(yǎng)細胞常用設(shè)備和用品
4.1.3 培養(yǎng)用品的清洗
4.1.4 培養(yǎng)用品的滅菌與消毒
4.1.5 無菌操作的基本要領(lǐng)和要求
4.1.6 細胞培養(yǎng)用液
4.2 細胞培養(yǎng)的方法
4.2.1 原代細胞培養(yǎng)
4.2.2 細胞傳代培養(yǎng)
4.3 體外培養(yǎng)細胞的觀察方法
4.3.1 培養(yǎng)細胞的生長特征與形態(tài)分型
4.3.2 培養(yǎng)細胞固定、染色觀察的一般標(biāo)本制備
4.3.3 細胞計數(shù)方法
4.3.4 細胞的顯微測量
4.4 培養(yǎng)細胞的凍存、復(fù)蘇與運輸
4.5 培養(yǎng)細胞增殖動力學(xué)方法
4.5.1 生長曲線的測定
4.5.2 分裂指數(shù)測定
4.5.3 克?。洌┬纬稍囼?br /> 4.5.4 BrdU摻入法測定細胞增殖指數(shù)
4.6 腫瘤細胞黏附和侵襲能力的體外檢測方法
4.6.1 腫瘤細胞的黏附能力分析實驗
4.6.2 細胞侵襲重建基底膜實驗
4.6.3 腫瘤細胞遷移實驗
4.7 哺乳動物正常組織細胞的體外培養(yǎng)與應(yīng)用
4.7.1 胎鼠大腦皮層神經(jīng)細胞的原代培養(yǎng)方法
4.7.2 含藥血清對體外培養(yǎng)細胞的藥理實驗
4.7.3 四氯化碳致肝細胞損傷及SOD活性檢測
第5章 培養(yǎng)細胞凋亡檢測技術(shù)
5.1 光學(xué)顯微鏡形態(tài)學(xué)檢測
5.1.1 臺盼藍染色法顯示凋亡細胞
5.1.2 蘇木精-伊紅染色（HE染色）顯示凋亡細胞
5.1.3 Giemsa染色法顯示凋亡細胞
5.1.4 吖啶橙熒光染色顯示凋亡細胞
5.1.5 Ho.33342與PI熒光雙染顯示凋亡與壞死細胞
5.2 凋亡細胞的超微結(jié)構(gòu)觀察
5.2.1 透射電鏡觀察凋亡細胞
5.2.2 掃描電鏡觀察凋亡細胞
5.3 凋亡細胞琥珀酸脫氫酶活性檢測（MTT法）
5.4 DNA電泳檢測凋亡梯狀帶
5.5 細胞膜磷脂酰絲氨酸熒光顯示
5.6 凋亡細胞原位末端標(biāo)記
第6章 細胞工程
6.1 細胞融合
6.1.1 聚乙二醇介導(dǎo)的細胞融合
6.1.2 細胞電融合
6.1.3 早熟染色體凝集的誘導(dǎo)和觀察
6.2 細胞的分離
6.2.1 淋巴細胞的分離純化
6.2.2 死活細胞的分離
6.3 細胞器的分離
第7章 原位雜交技術(shù)
7.1 地高辛標(biāo)記的原位雜交
7.2 放射性同位素標(biāo)記的原位雜交
7.3 胚胎整體原位雜交
第8章 細胞化學(xué)成分的分離與測定
8.1 蛋白質(zhì)SDS-PAGE凝膠電泳
8.2 真核細胞基因組DNA的提取
8.3 真核細胞RNA的提取
8.4 免疫沉淀法分離并定量分析目的蛋白質(zhì)
8.5 蛋白質(zhì)免疫印跡法
8.6 蛋白質(zhì)雙向電泳分析細胞和組織中的蛋白質(zhì)群
第9章 真核細胞基因轉(zhuǎn)染與表達技術(shù)
9.1 DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)
9.1.1 磷酸鈣轉(zhuǎn)染技術(shù)
9.1.2 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)
9.2 基因在細胞中表達的檢測技術(shù)
9.2.1 DNA印跡雜交法
9.2.2 RNA印跡雜交法
9.2.3 蛋白印跡雜交法
9.2.4 綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染及檢測
第10章 哺乳動物基因敲除技術(shù)
10.1 常用基因打靶載體的設(shè)計原則
10.1.1 P21（wAFl）基因打靶載體的構(gòu)建
10.1.2 C-Crk基因打靶載體的構(gòu)建
10.1.3 視黃醇脫氫酶RDH15基因打靶載體的構(gòu)建
10.2 胚胎干細胞基因敲除
10.2.1 胚胎干細胞的增殖和維持
10.2.2 胚胎干細胞標(biāo)準(zhǔn)電穿孔
10.2.3 鑒定、篩選重組的胚胎干細胞
10.3 嵌合體小鼠的制備
10.3.1 嵌合體小鼠的產(chǎn)生
10.3.2 GPI同工酶的水平淀粉凝膠電泳檢測嵌合體小鼠
10.4 基因敲除小鼠的建立
10.4.1 提取鼠尾DNA用PCR來檢測敲除基因
第11章 干細胞和組織工程技術(shù)
11.1 胚胎干細胞培養(yǎng)技術(shù)與方法
11.1.1 小鼠胚胎干細胞的分離、培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
11.1.2 人胚胎干細胞的分離和培養(yǎng)
11.1.3 人類胚胎干細胞定向分化成神經(jīng)細胞
11.2 成體干細胞培養(yǎng)技術(shù)與方法
11.2.1 成人骨髓基質(zhì)干細胞培養(yǎng)、純化及鑒定
11.2.2 人造血干/祖細胞的體外培養(yǎng)與檢測技術(shù)
11.2.3 大鼠胚胎腦神經(jīng)干細胞和祖細胞的分離培養(yǎng)
11.3 神經(jīng)組織工程
第12章 流式細胞術(shù)
12.1 流式細胞儀的結(jié)構(gòu)、工作原理及應(yīng)用
12.2 流式細胞儀檢測細胞膜受體（直標(biāo)法）
12.3 流式細胞儀同時檢測細胞內(nèi)和細胞外抗原
12.4 流式細胞儀檢測細胞凋亡（PI單染色法）
12.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡和壞死（PI和Annexin V-FITC雙染色法）
12.6 流式細胞儀檢測凋亡細胞內(nèi)游離鈣離子濃度變化
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