腎臟病學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程

第1章  細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
  第一節(jié)  細(xì)胞培養(yǎng)
    一、細(xì)胞復(fù)蘇與凍存
    二、原代近曲腎小管上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    三、原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    四、原代腎小球系膜細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    五、原代腎問質(zhì)成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    六、足細(xì)胞培養(yǎng)
    七、細(xì)胞共培養(yǎng)
    八、成體干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)
    九、細(xì)胞脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染
    十、腎臟細(xì)胞電轉(zhuǎn)方法
    十一、細(xì)胞原位雜交
  第二節(jié)  流式細(xì)胞儀技術(shù)
    一、普通細(xì)胞分選
    二、細(xì)胞無菌分選
    三、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)?大小
    四、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期
    五、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
  第三節(jié)  共聚焦技術(shù)Ⅰ——細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)定位、細(xì)胞器及自噬體等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)檢測(cè)
    一、共聚焦顯微鏡常規(guī)檢測(cè)方法
    二、細(xì)胞免疫熒光染色方法
    三、細(xì)胞免疫熒光多重染色
    四、細(xì)胞內(nèi)脂肪顆粒染色及檢測(cè)
    五、細(xì)胞骨架蛋白染色及檢?
    六、細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色及檢測(cè)
    七、細(xì)胞內(nèi)線粒體染色及檢測(cè)
    八、細(xì)胞內(nèi)溶酶體染色及檢測(cè)
    九、細(xì)胞內(nèi)自噬體染色及檢測(cè)
  第四節(jié)  共聚焦技術(shù)Ⅱ——活體細(xì)胞內(nèi)離子及功能的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)
    一、活體細(xì)胞內(nèi)離子動(dòng)態(tài)檢測(cè)常規(guī)方法
    二、細(xì)胞胞漿及線粒體Ca2+的染色及檢測(cè)
    三、細(xì)胞內(nèi)Na+染色及檢測(cè)
    四、細(xì)胞內(nèi)pH染色及檢測(cè)
    五、細(xì)胞線粒體膜電位的染色及檢測(cè)
    六、細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)染色及檢測(cè)
    七、細(xì)胞內(nèi)鈣離子震蕩及鈣火花檢測(cè)
    八、熒光光漂白恢復(fù)(FRAP)技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞間通訊
    九、熒光漂白丟失(FLIP)檢測(cè)細(xì)胞膜蛋白的流動(dòng)性及蛋白質(zhì)核轉(zhuǎn)位
    十、熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)檢測(cè)蛋白質(zhì)相互關(guān)系
    十一、細(xì)胞X-Z縱切掃描檢測(cè)極性細(xì)胞蛋白定位
    十二、細(xì)胞及組織切片三維重建
  第五節(jié)  共聚焦技術(shù)Ⅲ——熒光染料/探針標(biāo)記樣本存在的問題及分析對(duì)策
    一、熒光標(biāo)記樣品需要注意的問題
    二、熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)經(jīng)常出現(xiàn)的問題及對(duì)策
    三、典型舉例
  第六節(jié)  細(xì)胞實(shí)驗(yàn)其他技術(shù)
    一、MTT測(cè)定細(xì)胞活力
    二、細(xì)胞增殖測(cè)定(BrdU技術(shù))
    三、腎臟細(xì)胞微分離技術(shù)
    四、亞細(xì)胞組分分離技術(shù)
第2章  分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
  第一節(jié)  核酸的提取與純化
    一、DNA的提取與純化
  ……
第3章  病理學(xué)技術(shù)
第4章  轉(zhuǎn)基因技術(shù)
第5章  腎臟疾病動(dòng)物模型
第6章  電生理技術(shù)
第7章  留取尿液方法
第8章  腎臟病生物樣本資源庫的建設(shè)規(guī)范
附錄A  各實(shí)驗(yàn)室崗前培訓(xùn)內(nèi)容
附錄B  各實(shí)驗(yàn)室工作制度