白樺葉片內源激素與合成相關基因表達分析

目錄
《博士后文庫》序言
前言
1 緒論 1 
1.1 白樺的研究概況 1 
1.2 植物內源激素的研究進展 2 
1.2.1 內源激素種類 2 
1.2.2 內源激素提取分離方法的研究進展 4 
1.2.3 內源激素檢測方法的研究進展 6 
1.3 植物內源激素生物合成途徑的研究進展 8 
1.3.1 赤霉素生物合成途徑的研究進展 8 
1.3.2 脫落酸生物合成途徑的研究進展 8 
1.3.3 吲哚乙酸生物合成途徑的研究進展 .11
1.4 植物內源激素生物合成關鍵酶及其基因 12
1.4.1 赤霉素生物合成關鍵酶及其基因 12
1.4.2 脫落酸生物合成關鍵酶及其基因 16
1.5 生長素早期響應基因GH3 17
1.6 自然條件生長白樺的激素研究概況 18
1.7 本研究的目的與意義 20
2 內源激素提取方法研究 21
2.1 材料與方法 21
2.1.1 材料 21
2.1.2 方法 23
2.2 結果與分析 25
2.2.1 提取溶劑的選擇 25
2.2.2 提取溶劑濃度的選擇 25
2.2.3 淋洗液的選擇 26
2.2.4 洗脫液的選擇 27
2.2.5 酸化洗脫液的選擇 27
2.3 討論 28
2.4 本章小結 29
3 激素HPLC-PAD 檢測方法建立 30
3.1 材料與方法 30
3.1.1 材料 30
3.1.2 HPLC-PAD 檢測方法 32
3.1.3 HPLC-PAD 檢測方法學驗證 34
3.1.4 數(shù)據(jù)處理方法 34
3.2 結果與分析 34
3.2.1 四種激素的紫外特征吸收 34
3.2.2 HPLC-PAD 方法建立 37
3.3 討論 45
3.4 本章小結 45
4 激素含量LC-MS/MS 檢測方法建立 47
4.1 材料與方法 47
4.1.1 材料 47
4.1.2 LC-MS/MS 檢測方法 49
4.1.3 LC-MS/MS 檢測方法學驗證 51
4.1.4 數(shù)據(jù)處理方法 52
4.2 結果與分析 52
4.2.1 LC-MS/MS 檢測方法建立 52
4.2.2 檢測激素含量的LC-MS/MS 方法學驗證 60
4.2.3 樣品中各種激素含量的計算方法 62
4.3 討論 63
4.4 本章小結 64
5 白樺內源赤霉素含量及合成關鍵基因的表達分析 65
5.1 材料與方法 65
5.1.1 材料 65
5.1.2 實驗方法 68
5.1.3 內源GA3 和GA4 含量的時序變化分析 72
5.1.4 基因的克隆與分析 77
5.2 討論 80
5.2.1 內源GA3 和GA4 含量變化分析 80
5.2.2 內源GA 生物合成關鍵基因時序表達分析 81
5.3 本章小結 82
6 白樺內源脫落酸含量及合成關鍵基因的表達分析 83
6.1 材料與方法 83
6.1.1 材料 83
6.1.2 實驗方法 86
6.2 結果與分析 89
6.2.1 內源ABA 含量的時序變化分析 89
6.2.2 基因的克隆及表達分析 90
6.2.3 ABA 含量與調控ABA 合成關鍵基因表達量相關性分析 93
6.3 討論 93
6.3.1 內源ABA 含量變化分析 93
6.3.2 內源ABA 生物合成關鍵基因時序表達分析 94
6.4 本章小結 95
7 白樺內源吲哚乙酸含量和BpGH3基因家族的表達分析 97
7.1 材料與方法 97
7.1.1 材料 97
7.1.2 實驗方法 100 
7.2 結果與分析 103 
7.2.1 內源IAA 含量的時序變化分析 103 
7.2.2 基因的克隆與分析 104
7.2.3 生長素響應基因BpGH3 家族的表達與IAA 含量相關性分析 105
7.3 討論 107 
7.3.1 內源IAA 水平時序變化分析 107 
7.3.2 生長素響應基因BpGH3 的克隆與分析 108 
7.4 本章小結 109 8 結論 110
參考文獻 113
編后記 121