分子醫(yī)學與病原學實驗教程

第一篇 實驗基本要求及基本操作
第一章 實驗基本要求
第一節(jié) 實驗課的要求
第二節(jié) 實驗記錄的要求
第三節(jié) 實驗報告的書寫要求
第四節(jié) 實驗安全注意事項及意外事故的處理
第二章 實驗基本操作
第一節(jié) 玻璃儀器和塑料器皿的清洗與使用
第二節(jié) 計量器具及使用
第三節(jié) 試劑配制方法
第四節(jié) 實驗器材與溶液的消毒滅菌
第五節(jié) 溶液的混勻
第六節(jié) 溶液的pH測定
第七節(jié) 實驗樣品的制備
第八節(jié) 常用實驗動物及基本操作
第三章 常用儀器使用
第一節(jié) 顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和使用
第二節(jié) 分光光度計的基本結(jié)構(gòu)和使用
第三節(jié) 離心機的基本類型和使用
第四節(jié) 電泳系統(tǒng)
第五節(jié) 電子天平的分類和使用
第六節(jié) 培養(yǎng)箱的使用及注意事項
第七節(jié) PCR擴增儀
第八節(jié) 流式細胞儀
第二篇 基本實驗技術(shù)及基礎(chǔ)實驗
第四章 分光光度技術(shù)
實驗一 考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)的含量
實驗二 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量
實驗三 Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)濃度
實驗四 血清總膽固醇的測定（硫磷鐵法）
實驗五 血清甘油三酯（TG）含量測定（GPO一PAP法）
實驗六 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測定
第五章 電泳技術(shù)
實驗一 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳
實驗二 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗三 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳
實驗四 聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳分離蛋白質(zhì)
第六章 層析技術(shù)
實驗一 氨基酸的離子交換層析分離
實驗二 凝膠柱層析分離蛋白質(zhì)
第七章 離心分離技術(shù)
實驗一 差速離心法提取鼠肝核蛋白體RNA
實驗二 小鼠脾單個核細胞的分離
第八章 多聚酶鏈體外擴增技術(shù)
第九章 免疫學技術(shù)
第一節(jié) 抗體制備技術(shù)
實驗抗原與免疫血清的制備
第二節(jié) 抗原、抗體檢測技術(shù)
實驗一 沉淀試驗
實驗二 凝集試驗
實驗三 免疫比濁試驗
實驗四 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
第三節(jié) 免疫標記技術(shù)
實驗一 酶聯(lián)免疫吸附試驗
實驗二 免疫金標記技術(shù)
實驗三 免疫組織化學技術(shù)
第四節(jié) 免疫細胞功能檢測技術(shù)
實驗 吞噬細胞功能測定
第十章 細菌分析技術(shù)
實驗一 顯微鏡的使用與維護
實驗二 細菌的分離培養(yǎng)和接種技術(shù)
實驗三 細菌的生化反應(yīng)
實驗四 細菌的分布
實驗五 消毒滅菌效果觀察
實驗六 革蘭染色法
實驗七 紙片擴散法藥物敏感性試驗
實驗八 葡萄球菌屬細菌的培養(yǎng)和鑒定
實驗九 埃希菌屬細菌的培養(yǎng)和鑒定
實驗十 沙門菌屬細菌和志賀菌屬細菌的培養(yǎng)與鑒定
第十一章 分子雜交與免疫印跡技術(shù)
實驗一 Southern印跡雜交
實驗二 Northern印跡雜交
第十二章 細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染技術(shù)
實驗一 細胞的凍存與復(fù)蘇
實驗二 細胞MTT檢測方法
第三篇 綜合實驗
第十三章 基因組提取、目的基因擴增及鑒定
實驗一 基因組DNA的提取及定量
實驗二 PCR擴增目的基因
實驗三 瓊脂糖凝膠電泳鑒定目的基因片段
第十四章 血清白蛋白的提取、定量和檢測
實驗一 血清白蛋白的提取和分離
實驗二 血清白蛋白的定量
實驗三 SDS-PAGE檢測血清白蛋白純化效果
第十五章 脲酶動力學實驗
實驗一 脲酶的提取和活性測定
實驗二 脲酶Km值的簡易測定
實驗三 正交實驗優(yōu)化酶促反應(yīng)條件
實驗四 抑制劑對酶促反應(yīng)的影響
第十六章 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備及質(zhì)粒DNA分子導入原核細胞、
提取、純化鑒定
實驗質(zhì)粒DNA的提取、純化和檢測
第十七章 蛋白質(zhì)免疫印跡實驗
實驗一 動物組織總蛋白質(zhì)的提取
實驗二 蛋白質(zhì)含量測定（BCA法）
實驗三 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)
實驗四 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜
實驗五 免疫雜交及檢測
第四篇 自主設(shè)計實驗
第十八章 設(shè)計性實驗綜述
第一節(jié) 實驗設(shè)計的意義
第二節(jié) 實驗設(shè)計的原則
第三節(jié) 實驗設(shè)計的基本內(nèi)容
第四節(jié) 實驗設(shè)計的模式
第十九章 設(shè)計性實驗解析
第一節(jié) 核酸生化實驗設(shè)計解析
第二節(jié) 蛋白質(zhì)生化實驗設(shè)計解析
第二十章 設(shè)計性實驗
實驗一 miRNA研究及與臨床的關(guān)系
實驗二 腫瘤細胞或組織相關(guān)細胞因子檢測分析實驗的設(shè)計
實驗三 蛋白質(zhì)等電點
實驗四 天然產(chǎn)物中多糖的提取、純化與鑒定
附錄
參考文獻