葡萄抗病基因功能研究

序
前言
第一章 引言
第一節(jié) 植物免疫系統(tǒng)
一、植物先天免疫系統(tǒng)
二、植物后天免疫系統(tǒng)
第二節(jié) 泛素/26S蛋白酶體系統(tǒng)及其功能
一、泛素化過程
二、不同類型的泛素連接酶
三、26S蛋白酶體
四、泛素/蛋白酶體途徑在植物防御反應中的作用
第三節(jié) 研究目的與意義
第二章 材料與方法
第一節(jié) 試驗材料
一、植物材料
二、質粒載體與菌株
三、主要試劑
四、引物
五、培養(yǎng)基與試劑配制
第二節(jié) 試驗方法
一、生物信息學分析
二、載體構建
三、農桿菌介導的遺傳轉化
四、病原菌接種與病情調查
五、核酸分子操作方法
六、蛋白操作方法
七、酵母雙雜交試驗
八、亞細胞定位試驗
九、轉錄因子轉錄激活分析
十、雙分子熒光互補（BiFC）試驗
十一、蛋白質體內降解試驗
十二、啟動子活性檢測試驗
第三章 結果與分析
第一節(jié) UIRP1基因的克隆與序列分析
一、UIRP1基因的克隆
二、UIRP1基因序列分析
第二節(jié) UIRP1基因對病原菌的響應
第三節(jié) UIRP1基因的原核表達與酶活性分析
一、UIRP1基因的原核表達
二、UIRP1基因的酶活性分析
第四節(jié) UIRP1基因的亞細胞定位分析
第五節(jié) UIRP1基因啟動子的克隆與功能分析
一、UIRP1基因啟動子的克隆與序列分析
二、UIRP1基因啟動子功能分析
第六節(jié) UIRP1基因互作蛋白的篩選
一、誘餌表達載體的構建、毒性檢測與自激活分析
二、病原菌誘導的酵母表達cDNA文庫構建
三、雜交篩選UIRP1基因的互作蛋白
第七節(jié) BiFC驗證UIRP1基因與互作蛋白轉錄因子基因VpWRKY11的相互作用
第八節(jié) UIRP1基因的互作蛋白轉錄因子基因VpWRKY11的功能分析
一、轉錄因子基因VpWRKY11的序列分析
二、轉錄因子基因VpWRKY11的亞細胞定位分析
三、轉錄因子基因VpWRKY11的轉錄激活分析
四、轉錄因子基因VpWRKY11對病原菌的響應
第九節(jié) UIRP1基因與互作蛋白轉錄因子基因VpWRKY11的相互作用模式分析
一、UIRP1基因作用在轉錄因子基因VpWRKY11的上游
二、UIRP1基因在體內降解轉錄因子基因VpWRKY11
第十節(jié) UIRP1基因在擬南芥中過量表達分析
一、轉UIRP1基因擬南芥的鑒定與表型分析
二、轉UIRP1基因擬南芥的抗病性鑒定
三、轉UIRP1基因擬南芥中抗病相關基因的表達分析
第四章 討論
第一節(jié) 關于泛素連接酶基因研究
第二節(jié) 關于UIRP1基因參與植物抗病反應
第三節(jié) 關于UIRP1基因與有關轉錄因子基因的相互作用
第四節(jié) 關于轉錄因子基因參與抗病的反應方式
第五節(jié) 關于UIRP1基因作用底物
第六節(jié) 關于UIRP1基因泛素化轉錄因子基因VpWRKY11調控葡萄的抗病性
第五章 結論
參考文獻