硒在大米中的組學解析及其功能調控

第1章  硒的營養(yǎng)與富硒產(chǎn)品 1
1.1  硒的概述 1
1.1.1  硒的研究發(fā)展史 1
1.1.2  硒的存在形式與分布 1
1.2  硒的金屬組學研究進展 2
1.2.1  金屬組學 2
1.2.2  金屬組學的研究方向、內容與方法 3
1.2.3  硒的形態(tài)研究 4
1.3  硒形態(tài)解析方法 9
1.3.1  樣品前處理技術—硒的形態(tài)提取 9
1.3.2  硒形態(tài)的聯(lián)用檢測器技術 11
1.3.3  硒形態(tài)的聯(lián)用分離技術 13
1.3.4  分子質譜在硒形態(tài)結構鑒定方面的研究 19
1.4  硒的營養(yǎng)與生理功能 20
1.4.1  抗氧化作用 20
1.4.2  免疫作用 21
1.4.3  防癌抗癌作用 21
1.4.4  與重金屬拮抗作用 21
1.4.5  預防心腦血管疾病 22
1.4.6  預防糖尿病 22
1.5  富硒產(chǎn)品的現(xiàn)狀與開發(fā)前景 22
參考文獻 23
第2章  富硒水稻的生物強化與大米硒組學分析 29
2.1  不同產(chǎn)區(qū)大米硒水平分析 30
2.1.1  檢測方法的回收率、檢出限和準確性 31
2.1.2  全國水稻產(chǎn)區(qū)大米硒含量分析 31
2.1.3  大米產(chǎn)區(qū)居民硒的膳食營養(yǎng)評價 32
2.1.4  全國部分水稻產(chǎn)區(qū)不同品種大米硒的含量分析 33
2.2  外源硒在水稻中的分布規(guī)律及對大米品質的影響 35
2.2.1  外源硒對水稻籽粒吸收硒的影響 35
2.2.2  硒在水稻籽粒中的積累與分布 36
2.2.3  外源硒對水稻產(chǎn)量和籽粒品質的影響 36
2.3  富硒大米中硒化合物的金屬組學分析 37
2.3.1  硒形態(tài)提取方法的篩選 37
2.3.2  IP-RP-HPLC聯(lián)用ICPMS的色譜條件優(yōu)化 38
2.3.3  SeOMet的合成與鑒定 42
2.3.4  RP-HPLC-ICPMS定量分析方法的質量控制 43
2.3.5  SAX-HPLC聯(lián)用ICPMS的色譜條件優(yōu)化 45
2.3.6  富硒大米與普通大米中硒的化合物鑒定 46
2.3.7  硒在水稻葉面向籽粒中吸收、轉運及代謝的可能途徑 49
2.4  富硒大米含硒蛋白提取方法的優(yōu)化 50
2.4.1  硒在富硒大米中的分布 52
2.4.2  等電點沉淀蛋白的pH值篩選 53
2.4.3  富硒大米含硒蛋白提取工藝單因素實驗 54
2.4.4  富硒大米含硒蛋白提取工藝正交實驗 57
2.5  富硒大米含硒蛋白的鑒定及體外生物有效性 58
2.5.1  富硒大米含硒蛋白體外生物有效性 61
2.5.2  富硒大米中含硒蛋白的分布 63
2.5.3  富硒大米四類蛋白質中含硒蛋白的分子量 64
2.6  含硒蛋白營養(yǎng)復配研究 69
2.6.1  富硒米糠蛋白質與硒含量 70
2.6.2  米糠含硒蛋白的提取 71
2.6.3  復配蛋白硒含量及蛋白質純度 72
2.6.4  復配蛋白氨基酸組成 73
2.6.5  復配蛋白質營養(yǎng)價值評價 74
2.7  小結 75
參考文獻 76
第3章  富硒大米含硒蛋白酶解物的免疫調節(jié)功能 79
3.1  酶解方法的優(yōu)化 79
3.1.1  酶的選擇 80
3.1.2  酶解單因素選擇 81
3.1.3  酶解正交試驗 86
3.1.4  最佳條件酶解產(chǎn)物還原能力 88
3.2  含硒蛋白酶解液中痕量硒的檢測方法 89
3.2.1  樣品前處理 89
3.2.2  硒測定 91
3.2.3  質譜干擾的消除 91
3.2.4  標準曲線與相關系數(shù) 92
3.2.5  方法的檢出限與準確度 92
3.2.6  方法的加標回收率和精密度 93
3.2.7  直接進樣ICPMS法的應用 93
3.3  含硒蛋白酶解液的抗氧化活性與免疫活性的相關性 96
3.3.1  抗氧化活性 96
3.3.2  免疫活性 100
3.3.3  硒含量和體外細胞抗氧化活性、免疫活性的關系 102
3.3.4  酶解物體外細胞抗氧化活性和免疫活性的關系 104
3.4  免疫活性硒肽的分離純化方法 104
3.4.1  不同酶解產(chǎn)物的水解度和硒含量差別 105
3.4.2  免疫活性篩選細胞模型的建立 106
3.4.3  基于免疫活性對蛋白酶的篩選 108
3.4.4  含硒肽的凝膠色譜分離純化 111
3.5  免疫活性硒肽的結構鑒定 113
3.5.1  不同組分硒肽的體外免疫活性研究 113
3.5.2  硒肽的一級結構鑒定 115
3.5.3  高置信度硒肽質譜圖分析 118
3.6  小結 119
參考文獻 120
第4章  大米硒肽緩解鉛損傷作用及其調控機制 123
4.1  鉛損傷模型的建立 123
4.1.1  細胞株型與鉛濃度選擇 123
4.1.2  作用時間及時間點選擇 124
4.2  大米硒肽對鉛損傷細胞的影響 125
4.2.1  硒肽對鉛損傷細胞活力的影響 125
4.2.2  硒肽對鉛損傷細胞氧化應激水平的影響 126
4.2.3  硒肽對鉛損傷細胞膜的影響 128
4.2.4  硒肽對鉛損傷細胞抗氧化防御能力的影響 130
4.3  大米硒肽緩解鉛損傷機制 132
4.3.1  硒肽對鉛損傷細胞凋亡形態(tài)的影響 133
4.3.2  硒肽對鉛損傷細胞MMP的影響 134
4.3.3  硒肽對鉛損傷細胞Caspases活性的影響 135
4.3.4  硒肽對鉛損傷細胞Bax、Bcl-2、Cyt C蛋白質表達的影響 136
4.4  硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ對神經(jīng)細胞氧化毒性的保護作用 137
4.4.1  硒肽對Pb2 誘導HT22細胞氧化毒性的保護作用 138
4.4.2  TSeMMM和SeMDPGQQ對Pb2 損傷大鼠胚胎原代皮層神經(jīng)細胞轉錄組的影響 146
4.5  硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ對鉛致毒斑馬魚的影響 154
4.5.1  Pb2 濃度及培養(yǎng)時間對斑馬魚幼魚的影響 154
4.5.2  硒肽濃度對Pb2 誘導斑馬魚運動軌跡的影響 155
4.5.3  硒肽對Pb2 誘導斑馬魚體內Se、Pb2 含量的影響 156
4.5.4  硒肽對Pb2 誘導斑馬魚Nrf2-ARE信號通路的影響 157
4.5.5  硒肽對斑馬魚幼魚體內Atp6v0e1與miR-107-3p基因表達的影響 159
4.6  小結 160
參考文獻 161
第5章  大米硒肽的活性保護與生物活性功能調控 163
5.1  納米顆粒包埋作用研究進展 163
5.2  溶菌酶/黃原膠納米顆粒的制備與表征 164
5.2.1  pH對Ly/XG復合物溶液濁度的影響 164
5.2.2  不同處理方式對納米顆粒粒徑的影響 165
5.2.3  納米顆粒制備條件的優(yōu)化結果 166
5.2.4  微觀形貌表征 168
5.2.5  納米顆粒的元素組成 168
5.2.6  熱處理對納米顆粒特征官能團的影響 169
5.2.7  熱處理對蛋白質二級結構的影響 170
5.2.8  熱處理對蛋白質內源熒光和表面疏水性的影響 171
5.3  玉米醇溶蛋白/阿拉伯膠納米顆粒的制備與表征 172
5.3.1  樣品溶液的制備 172
5.3.2  納米顆粒制備條件的優(yōu)化 173
5.3.3  不同濃度下zein/GA的粒徑和分散指數(shù) 173
5.4  不同納米顆粒對大米硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ的包埋作用 174
5.4.1  溶菌酶/黃原膠納米顆粒對大米硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ的包埋作用 174
5.4.2  玉米醇溶蛋白/阿拉伯膠納米顆粒對大米硒肽TSeMMM的包埋作用 181
5.5  包埋作用對硒肽吸收特性及其免疫調節(jié)作用的影響 186
5.5.1  溶菌酶/黃原膠納米顆粒對硒肽的體外釋放和細胞轉運研究 186
5.5.2  zein@T/GA納米顆粒的體內體外釋放效果及體內生物利用度研究 194
5.5.3  zein@T/GA納米顆粒對免疫低下小鼠的免疫調節(jié)作用 199
5.6  小結 205
參考文獻 207