大豆肽的功能性應用

第1章大豆肽對免疫力的調節(jié)作用 1
1.1引言1
1.1.1免疫調節(jié)對人體健康的重要性1
1.1.2肽對免疫力調節(jié)作用的研究現狀1
1.1.3本章研究內容與意義1
1.2研究方法2
1.2.1大豆肽的制備2
1.2.2大豆肽的SDS-PAGE分析2
1.2.3大豆肽的分子量分布2
1.2.4大豆肽的氨基酸組成分析2
1.2.5負氮平衡老年小鼠模型的制備2
1.2.6小鼠氮代謝的測定2
1.2.7小鼠血清蛋白含量的測定3
1.2.8金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)3
1.2.9小鼠分組與處理3
1.2.10小鼠免疫器官指數的測定3
1.2.11小鼠血清免疫球蛋白含量的測定4
1.2.12小鼠促炎性細胞因子含量的測定4
1.2.13小鼠血清趨化因子的測定4
1.3研究結果4
1.3.1大豆肽的SDS-PAGE分析4
1.3.2大豆肽的分子質量分布4
1.3.3大豆肽的氨基酸分析5
1.3.4負氮平衡老年小鼠模型的構建5
1.3.5大豆肽對小鼠免疫器官指數的影響6
1.3.6大豆肽對小鼠血清免疫球蛋白水平的影響7
1.3.7大豆肽對小鼠血清促炎性細胞因子水平的影響8
1.3.8大豆肽對小鼠血清趨化因子水平的影響9
1.4研究結論10
參考文獻10
第2章大豆肽對炎癥的預防作用 11
2.1引言11
2.1.1炎癥預防對人體健康的重要性11
2.1.2肽對炎癥預防作用的研究現狀11
2.1.3本章研究內容與意義12
2.2研究方法12
2.2.1不同序列組成大豆肽的制備12
2.2.2蛋白含量測定12
2.2.3水解度測定13
2.2.4分子量測定13
2.2.5不同序列組成大豆肽質譜測定13
2.2.6細胞培養(yǎng)13
2.2.7脂多糖誘導濃度選擇和肽預防濃度的選擇13
2.2.8不同酶解方案下大豆肽營養(yǎng)干預的保護作用13
2.2.9炎癥因子和趨化因子的測定13
2.2.10蛋白免疫印跡14
2.3研究結果14
2.3.1大豆蛋白在不同酶解工藝下的水解度分析14
2.3.2大豆分離蛋白在不同酶解工藝下的分子質量分布分析14
2.3.3大豆分離蛋白在不同酶解工藝下所得大豆肽的序列組成差異15
2.3.4大豆分離蛋白在不同酶解工藝下所得大豆肽的序列特征差異16
2.3.5不同酶解方案下大豆肽對RAW264.7細胞的炎癥保護作用17
2.3.6不同酶解工藝下大豆肽序列特征差異對炎癥預防作用的影響18
2.4研究結論20
參考文獻21
第3章大豆肽對慢性焦慮的調控及作用機制 22
3.1引言22
3.1.1抗焦慮對人體健康的重要性22
3.1.2抗焦慮肽的研究現狀22
3.1.3本章研究內容與意義23
3.2研究方法23
3.2.1小鼠飼料的制備23
3.2.2小鼠焦慮模型的構建24
3.2.3小鼠的分組及處理24
3.2.4神經行為學實驗25
3.2.5免疫組織化學25
3.2.6小鼠腦組織中神經遞質水平的測定25
3.2.7生化指標的測定26
3.2.8蛋白質印跡分析26
3.2.9小鼠血清代謝物的非靶代謝組學分析26
3.2.10實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-qPCR）27
3.2.11小鼠盲腸內容物中腸道微生物分析27
3.2.12小鼠盲腸內容物中短鏈脂肪酸的測定27
3.3研究結果28
3.3.1大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠焦慮樣行為的影響28
3.3.2大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠海馬體神經元興奮性的影響29
3.3.3大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠腦組織中神經遞質水平的影響29
3.3.4大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠海馬體小膠質細胞的影響31
3.3.5大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠腦組織中炎癥因子水平的影響32
3.3.6大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠腦組織中BDNF水平及BDNF-TrkB-CREB通路的影響33
3.3.7大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠血清中HPA軸激素的影響34
3.3.8大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠血清中代謝物的影響34
3.3.9大豆肽營養(yǎng)干預對皮質酮合成分泌通路中基因表達的影響37
3.3.10大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠盲腸內容物中腸道菌群的影響38
3.3.11大豆肽營養(yǎng)干預對小鼠盲腸內容物中短鏈脂肪酸的影響39
3.3.12相關性分析40
3.4研究結論42
參考文獻43
第4章大豆肽對睡眠的改善作用 45
4.1引言45
4.1.1睡眠對人體健康的重要性45
4.1.2肽對睡眠改善的研究現狀45
4.1.3本章研究內容與意義46
4.2研究方法46
4.2.1實驗動物46
4.2.2果蠅的睡眠監(jiān)控46
4.2.3果蠅頭部RNA提取和實時熒光定量PCR47
4.2.4果蠅頭部GABA、5-HT、Glu和His的測量47
4.2.5戊巴比妥鈉誘發(fā)的睡眠試驗47
4.2.6腦神經遞質含量的測定47
4.2.7蛋白質印跡48
4.3研究結果48
4.3.1大豆肽對果蠅睡眠時長的影響48
4.3.2大豆肽對果蠅生物鐘基因的營養(yǎng)調節(jié)49
4.3.3大豆肽對果蠅睡眠調控相關神經遞質合成基因的營養(yǎng)調節(jié)49
4.3.4戊巴比妥鈉誘發(fā)的睡眠試驗中大豆肽的作用50
4.3.5小鼠腦中神經遞質水平分析51
4.3.6大豆肽對TPH蛋白表達的影響53
4.3.7大豆肽對AANAT、MT1、MT2蛋白表達的影響53
4.4研究結論55
參考文獻55
第5章大豆肽改善血糖功能性 57
5.1引言57
5.1.1血糖功能性改善對人體健康的重要性57
5.1.2肽對血糖功能性改善的研究現狀57
5.1.3本章研究內容與意義57
5.2大豆蛋白肽對正常條件胰腺B細胞功能的調控及作用機制58
5.2.1研究方法58
5.2.2研究結果60
5.2.3研究結論65
5.3大豆蛋白肽對高糖毒性條件下胰腺B細胞功能的調控及作用機制66
5.3.1研究方法66
5.3.2研究結果67
5.3.3研究結論75
參考文獻76
第6章大豆肽對預防和治療肌肉萎縮的作用 77
6.1引言77
6.1.1肌肉健康對人體健康的重要性77
6.1.2肽對預防和治療肌肉萎縮作用的研究內容77
6.1.3本章研究內容與意義77
6.2研究方法78
6.2.1動物分組及灌胃設計78
6.2.2血清和肌肉樣品采集78
6.2.3血清相關指標測定78
6.2.4總蛋白提取及蛋白定量78
6.2.5Western blotting分析79
6.3研究結果79
6.3.1大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠肌肉萎縮的預防作用79
6.3.2大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠肌肉萎縮的治療作用81
6.4結論84
參考文獻84
第7章大豆肽對傷口恢復的促進作用 85
7.1引言85
7.1.1創(chuàng)傷對人體健康的危害85
7.1.2肽對傷口恢復促進作用的研究現狀85
7.1.3本章研究內容與意義85
7.2研究方法86
7.2.1實驗動物分組及處理86
7.2.2背部全層皮膚創(chuàng)傷模型的建立86
7.2.3實驗動物的營養(yǎng)干預86
7.2.4傷口觀察及測量86
7.2.5白細胞總數的測定87
7.2.6細胞因子的測定87
7.2.7大鼠血清蛋白含量的測定87
7.2.8組織病理學檢查87
7.3研究結果87
7.3.1大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠體重的影響87
7.3.2大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠血清蛋白濃度的影響87
7.3.3大鼠傷口恢復的宏觀觀察88
7.3.4大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠傷口恢復率的影響88
7.3.5大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠白細胞總數的影響89
7.3.6大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠細胞因子的影響89
7.3.7大豆肽營養(yǎng)干預對大鼠傷口皮膚組織病理結構的影響90
7.4研究結論92
參考文獻93
第8章大豆肽通過改善內皮細胞功能調節(jié)心血管疾病 94
8.1引言94
8.1.1內皮功能改善對心血管健康的重要性94
8.1.2大豆肽對內皮功能改善的研究現狀94
8.1.3本章研究內容與意義96
8.2研究方法97
8.2.1細胞培養(yǎng)和大豆低聚肽處理細胞97
8.2.2細胞活力測定97
8.2.3內皮細胞炎癥因子IL-6和IL-8的測定97
8.2.4細胞內NO、MDA和SOD的測定97
8.2.5細胞中ROS的測定方法97
8.2.6細胞轉染98
8.2.7熒光定量PCR98
8.2.8蛋白質免疫印跡檢測98
8.2.9數據處理與分析99
8.3研究結果99
8.3.1大豆低聚肽在正常生理模型下對內皮功能的調節(jié)機制99
8.3.2大豆低聚肽在高血壓模型下對內皮功能的調控102
8.3.3大豆低聚肽通過miRNAs調控內皮功能作用機制106
8.4研究結論108
參考文獻108
第9章大豆肽對益生菌的調節(jié)作用 111
9.1引言111
9.1.1腸道益生菌對人體健康的重要性111
9.1.2肽對益生菌調控功能改善的研究現狀112
9.1.3研究內容與意義114
9.2研究方法115
9.2.1大豆蛋白和大豆肽體外模擬胃腸消化樣品的制備115
9.2.2不同益生菌處理組的培養(yǎng)基成分115
9.2.3不同益生菌生長期的測定116
9.2.4鼠李糖乳桿菌短鏈脂肪酸的測定116
9.2.5羅伊氏乳桿菌DSM17938細胞培養(yǎng)116
9.2.6羅伊氏乳桿菌DSM17938黏附條件的測定117
9.2.7不同處理組羅伊氏乳桿菌DSM17938對HT-29細胞的黏附能力比較117
9.2.8羅伊氏乳桿菌DSM17938細胞毒性試驗117
9.2.9dspe和dspr對HT-29細胞黏附能力的影響117
9.2.10觀察羅伊氏乳桿菌DSM17938對HT-29細胞的黏附118
9.2.11統(tǒng)計與分析118
9.3研究結果118
9.3.1不同益生菌生長期的測定118
9.3.2鼠李糖乳桿菌短鏈脂肪酸的測定120
9.3.3羅伊氏乳桿菌DSM17938黏附HT-29細胞的模型構建122
9.3.4不同處理組羅伊氏乳桿菌DSM17938對HT-29細胞的黏附能力比較123
9.3.5dspe和dspr對HT-29細胞黏附能力的影響123
9.4研究結論124
9.4.1大豆蛋白和大豆肽及其消化產物對鼠李糖乳桿菌的影響124
9.4.2大豆蛋白和大豆肽及其消化產物對羅伊氏乳桿菌的影響125
參考文獻125
第10章大豆肽對熱損傷的保護作用及機制研究 127
10.1引言127
10.1.1熱應激在運動中的不利影響127
10.1.2肽對熱損傷保護作用的研究現狀127
10.1.3本章研究內容與意義127
10.2研究方法128
10.2.1大豆肽及其富硒化產物的制備及成分分析128
10.2.2大豆肽及其富硒化產物對大鼠熱損傷的保護作用129
10.3研究結果131
10.3.1大豆肽及其富硒化產物的制備及成分分析131
10.3.2大豆肽及其富硒化產物對大鼠熱損傷的保護作用133
10.4研究結論136
10.4.1大豆肽及其富硒化產物的制備及成分分析136
10.4.2大豆肽及其富硒化產物對大鼠熱損傷的保護作用136
參考文獻137
第11章大豆肽對肺部損傷的改善作用 138
11.1引言138
11.1.1肺部損傷對人體健康的危害138
11.1.2肽對肺部損傷改善作用的研究現狀138
11.1.3本章研究內容與意義139
11.2研究方法139
11.2.1PM2.5溶液的配制139
11.2.2PM2.5誘導小鼠肺損傷模型的建立139
11.2.3實驗動物分組及處理139
11.2.4肺泡灌洗液中蛋白含量的測定140
11.2.5BALF中白細胞組成測定140
11.2.6細胞因子的測定140
11.2.7小鼠血清蛋白含量的測定140
11.2.8組織病理學檢查141
11.2.9蛋白質印跡分析測定141
11.3研究結果141
11.3.1大豆肽及富硒大豆肽對小鼠體重的影響141
11.3.2大豆肽及富硒大豆肽對小鼠肺組織病理結構的影響141
11.3.3大豆肽及富硒大豆肽對小鼠BALF蛋白含量的影響142
11.3.4大豆肽及富硒大豆肽對小鼠BALF抗氧化能力的影響143
11.3.5大豆肽及富硒大豆肽對小鼠BALF中白細胞的影響143
11.3.6大豆肽及富硒大豆肽對小鼠促炎性細胞因子水平的影響144
11.3.7大豆肽及富硒大豆肽對小鼠肺組織TLR4/NF-κB/IκBα信號通路蛋白表達的影響144
11.3.8大豆肽及富硒大豆肽對小鼠肺組織NLRP3-Caspase-1信號通路蛋白表達的影響145
11.4研究結論146
參考文獻147
第12章大豆肽鈣螯合作用及促鈣吸收 148
12.1引言148
12.1.1保證正常鈣攝入量對人體健康的重要性148
12.1.2肽調節(jié)鈣攝入量的研究現狀148
12.1.3本章的研究內容與意義148
12.2研究方法149
12.2.1高鈣結合能力大豆肽構效關系149
12.2.2高鈣結合大豆肽-鈣螯合物促鈣吸收機理研究150
12.3研究結果152
12.3.1高鈣結合能力大豆肽構效關系152
12.3.2高鈣結合大豆肽-鈣螯合物促鈣吸收機理研究157
12.4主要結論163
參考文獻163